奶牛子宮內膜上皮外培養及鑒定

試驗采用酶消化及機械法相結合的方法培養奶牛子宮內膜上皮原代細胞及傳代細胞。酶消化法采用0.1%鏈蛋白酶于4℃消化16~20h,機械法采用手術刀刮取子宮角內膜。獲得原代分離的細胞后,采用胰蛋白酶消化法進行細胞的傳代培養。試驗應用角蛋白抗體對細胞進行免疫細胞化學鑒定,并對第3代奶牛子宮內膜上皮細胞用MTT法繪制增殖曲線。結果顯示,細胞在相差顯微鏡下呈明顯的上皮樣細胞形態,細胞傳代到第8代時,仍能保持與原代細胞相似的細胞形態特征及生長狀態。同時細胞角蛋白染色陽性細胞占80%以上。試驗結果表明,應用酶消化和機械法可成功分離并培養數量、活力和純度均較高的子宮內膜細胞,可操作性強,可在具備基本細胞培養條件的實驗室應用推廣。